Diafanização De Tecidos Moles E Coloração Do Tecido ósseo

Diafanização de tecidos moles e coloração do tecido ósseo pelo vermelho de Alizarina

Materiais necessários:
*Anestésicos:
* Éter Sulfúrico
* Gelo
* Benzocaína Fixador:
* Formol a 10%
* Hidróxido de Potássio (KOH)
* Álcool 92%
- Corantes:
* Vermelho de Alizarina
* Alizarina P.A.
* Alizarina Red S.(para ossos e cartilagens)
* Glicerina (bem transparente vidro âmbar - escuro)
* Timol/ Canfora (fungicida)
* Luvas Cirúrgicas
* Pinças de ponta fina
* Pinças dente de rato
* Frascos plásticos de tamanhos diversos
* Linha de nylon transparente nº 10
* Laminas cortantes

Procedimento técnico:

1- Morte dos animais:
- Mamíferos, aves, répteis. (éter sulfúrico ou outros)
- Anfíbios. (gelo)
- Peixes. (gelo, benzocaína, MS 222 (anestésico p/ peixes), ou outros).
Obs.: não danificar a carcaça.

2- Fixação:
- Formol a 10% Mamíferos e outros: 3 dias
Peixes: 1 dia

• Os animais devem permanecer totalmente imersos na solução fixadora.
• Esta deve ser injetada nos orifícios naturais.
• Colocar os animais em recipientes que não deformam sua posição natural.

3- Ablação da pele:
• Em embriões e fetos, realizada após passagem dos espécimes pelo álcool absoluto, feito de maneira cuidadosa, não lesando tecidos profundos.

Obs: Em regiões de difícil acesso, não efetuar o processo.

4- Evisceração e retirada dos olhos:

• Realizada através de pequena incisão abdominal, retirando-os fragmentos de todos os órgãos cuidadosamente com uma pinça.
• Animais de boca grande como sapos, rãs e pererecas, retirar os órgãos pela boca.

5- Retirada de tecido adiposo:

• Feito de maneira cuidadosa, retirando-se tecido adiposo marrom e branco (amarelo), não lesando tecidos profundos.

6- Desidratação:

- Álcool 95% por 4 dias
- Álcool absoluto por 3 dias
Obs: Se necessário trocar o álcool diariamente. Peça bem desidratada tem cor bastante pálida.

7- Maceração I: • Imersão em solução de KOH a 2% por tempo indeterminado cuja variação depende da idade e tamanho do espécime trabalhado.
• Renovar