Determinação do teor de proteína pelo método de Kjeldahl

Centro Universitário Planalto do Distrito Federal
Curso: Nutrição 1° Semestre
Disciplina: Bromatologia
Alunos: Pabline Santos, Simone Couto, Stéphany Brena, Tatyana Fernandes, Thayline Barreira
Professora: Milena Olivieri Lisita

Determinação do teor de proteína pelo método de Kjeldahl

Introdução
A determinação do nitrogênio total (NT) proposta por Kjeldahl em 1883, ainda é muito usada por ser uma técnica confiável, com rotinas bem estabelecidas e ao longo do tempo permaneceu praticamente a mesma com poucas modificações (VOGEL, 1992). Esta técnica possibilita a determinação indireta de proteína em várias amostras biológicas (YASUHARA e NOKIHARA, 2001; NOGUEIRA e SOUZA, 2005). O método é baseado na decomposição da matéria orgânica através da digestão da amostra com ácido sulfúrico concentrado, em presença de sulfato de cobre como catalisador que acelera a oxidação da matéria orgânica. O nitrogênio presente na solução ácida resultante é determinado por destilação por arraste a vapor, seguida de titulação com ácido diluído (NOGUEIRA e SOUZA, 2005).

Objetivo
Analisar o teor de proteína em amostra do leite em pó, utilizando o método de Kjeldahl.

Amostra
Leite massa 0,2g

Materiais e Métodos
Primeira etapa: Digestão
Pesou-se a amostra em tubo digestor (0,2g de leite) na balança analítica, após a pesagem foi encaminhado a capela de exaustão para ser acrescentado o ácido sulfúrico H2SO4 5ml, após a mistura ele obteve a cor azul esverdeado, livre de pontos pretos, a amostra foi para o bloco digestor que foi aquecido gradativamente até 350°C. Após a digestão foi transformado em sal amoniacal, que ficou transparente.
Segunda etapa: Destilação
Adicionou água destilada com auxilio de uma pisseta aos tubos frios, lavando as paredes do destilador de nitrogênio. Colocou o tubo diluído com hidróxido de sódio NaOH 100% que ficou branco, no destilador. Colocou-se 10ml de ácido bórico H3BO3 de cor rosa em um erlenmeyer para recolher o destilado, a liberação de