Cromatografia

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CROMATOGRAFIA

Trabalho realizado por: Francisco Roque, nº 9 11ºA 27-04-01

INTRODUÇÃO
A cromatografia é uma técnica analítica, qualitativa, que permite separar os componentes de uma mistura atendendo a propriedades como a solubilidade, tamanho e massa. Baseia-se nas diferentes velocidades de deslocamento das moléculas através de um meio poroso – fase estacionária -, quando arrastadas porum eluente (líquido ou gasoso) em movimento – fase móvel. A separação cromatográfica está relacionada com o fenómeno de adsorção (aderência de partículas, moléculas ou iões) à fase estacionária, que pode ser um papel poroso, sílica gel, albumina, etc. Quando misturas gasosas ou líquidas são postas em contacto com um meio sólido, as diferentes moléculas ou iões que as constituem, são por ele retidasmais ou menos fortemente, consoante as suas características anteriormente referidas. Depois das partículas aderirem ao suporte, na fase estacionária, é possível separá-las recorrendo a eluentes apropriados. O suporte cromatográfico pode ser apresentado como camada plana, para a cromatografia de camada plana e enchimento de uma coluna, na cromatografia em coluna. A cromatografia pode ser, quantoao método de introdução da amostra, zonal, onde a amostra é aplicada de uma só vez, numa determinada zona e que permite separar completamente todos os componentes de uma amostra; ou frontal, quando a amostra é introduzida de um modo contínuo e cada componente é retido pela fase estacionária até à saturação desta, após o que atravessa completamente na fase móvel. As técnicas cromatográficas podemser classificadas como: Cromatografia de partição Esta baseia-se nas diferentes solubilidades dos componentes de uma mistura, em ambas as fases, as quais são as duas líquidas. Pode ser efectuada em papel ou em coluna como suportes. Ambos estes processos vão ser descritos mais à frente. O coeficiente de partição é independente da concentração e de outras substâncias da mistura. Cromatografia deadsorção Baseia-se nas diferentes afinidades adsorventes da superfície da fase estacionária. É uma cromatografia em que a fase móvel é liquida e a fase estacionária é sólida. O suporte pode ser de alumina ou sacarose para a cromatografia de coluna e vidro ou alumínio para a cromatografia em camada fina. A separação baseia-se nas interacções entre moléculas dos solutos da fase móvel liquida e asuperfície da fase estacionária sólida. Existem dois tipos de cromatografia de adsorção, em camada fina, onde se faz passar lentamente através de uma coluna de material adsorvente uma mistura líquida, cujos componentes se vão depositando em zonas distintas da coluna, devido à diferença de velocidade de arrastamento de cada um; e em coluna, que se aplica sobretudo em separação de espécies não-iónicassolúveis em solventes orgânicos segundo a polaridade, o número relativo e a posição do grupo funcional. Esta técnica tem as desvantagem do aparecimento de caudas nas bandas e na dificuldade de reprodução da actividade da fase estacionária quando se usam agentes desactivadores.

A adsorção pode ser feita quer por substâncias apolares (carvão activado), quer por substâncias polares (óxidos e sais). Alémdas moléculas do soluto, também as moléculas do solvente são adsorvidas pela fase sólida, sendo necessária a deslocação de moléculas adsorvidas de solvente por moléculas de soluto, para adsorção destas. Ainda existe também a cromatografia de partição iónica. Todos estes processos cromatográficos baseiam-se em alguns princípios como a mudança de fase (adsorção a um suporte sólido), partição degases ou separação em solução que pode acontecer por efeito de crivo ou efeito eléctrico. Ao introduzir uma amostra na coluna, ela é arrastada pelo eluente e sofre sempre alguma dispersão. As principais causas disto são: - A não existência de um equilíbrio entre as duas fases. - Problemas de transferência de massas. - A possibilidade de existência de reacções do soluto com a fase fixa sendo esta...
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