Cristalização e Análise Estrutural da LIsozima

UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
CURSO DE CIÊNCIAS MOLECULARES

Prática de Laboratório III e IV: Cristalização de
Análise Estrutural da Lisozima
Relatório

SÃO PAULO – SP
AGOSTO 2013

Sumário
1.Introdução...................................................3
2.Materiais e Métodos.....................................3
3.Resultados e Exercícios................................5
4.Conclusão....................................................9
5.Bibliografia.................................................10

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1.Introdução
Dentre os problemas mais desafiadores da bioquímica atual, está a questão do enovelamento de proteínas. Para estudar a eficácia de métodos de modelagem, são necessárias incessantes experiências e tentativas, levando a um progressivo aperfeiçoamento das técnicas experimentais.
Tal progresso é crucial em nossa compreensão da relação entre sequência de aminoácidos e a estrutura de proteínas resultante. Como a estrutura determina a função das proteínas e compostos, é desnecessário dizer que qualquer avanço nessa área pode ser muito expressivo na área biomédica.
Assim, nos cabe uma introdução aos métodos da cristalografia e da espectroscopia RMN.
A cristalografia consiste na análise dos padrões de difração de raios-X incidentes sobre um cristal da proteína estudada, enquanto a espectroscopia de massas é caracterizada por um bombardeamento de uma pequena quantidade de material por íons, seguido de avaliação dos espectros energéticos incidentes sobre um espectrômetro.

2.Materiais e Métodos
Nesta seção, descreveremos a aparelhagem empregada na realização do experimento, bem como o procedimento adotado.

2.1.Materiais

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 Solução de acetato de sódio (H3CCOO-Na+) 2 mM
(A)

 Solução mista de cloreto de sódio (NaCl) 7,8 ou 9 g/mL + acetato de sódio 250 mM a pH 4.0,4.3 e
4.6 (B)

 Solução de PEG 4000 (Polietilenoglicol) 30 g/mL
+ 50 mM de acetato de sódio a pH 4.6 (C)

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