COLORAÇÃO DIFERENCIAL DE GRAM E COLORAÇÃO PELO METODO DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR)

COLORAÇÃO DIFERENCIAL DE GRAM E COLORAÇÃO PELO METODO DE ZIEHL-NEELSEN (BAAR)

Erlyangela López
Fabiana Farias
Jucilene Moreira
Juliana de Jesus
Maria Eunice Carvalho

TERESINA/PIAUÍ
2013

SUMARIO

1 INTRODUÇÃO

2 OBJETIVOS
Observação da morfologia bacteriana;
Observação diferencial da morfologia bacteriana;
Treinamento de preparação de lâminas coradas.
3 MATERIAL
Bico de Bunsen
Corante
Estante para coloração de lâminas
Lâminas
Microscópio óptico
Placa de Agar simples, Agar sangue e Agar chocolate com crescimento bacteriano
Papel filtro
Salina
4 PROCEDIMENTO
Esterelizou-se as lâminas na cham do bico de Bunsen, colocou-se uma gota de solução salina nas lâminas e com o auxilio de uma alça de platina usando manobras assépticas colheu-se uma gota do meio e depositou-se no centro da lâmina em cima da gota de solução salina. Com movimentos suaves dispersou-se a gota de maneira uniforme para que as células microbianas fossem regularmente distribuídas. Após o esfregaço ter secado ao ar livre, foi fixado na chama do bico de Bunsen. Na coloração diferencial de gram, após ter sido feito todo esse procedimento, colocou-se as lâminas na estante previamente fixadas e cobriu-se com solução de violeta durante 1 minuto. Escorreu-se e lavou-se com água corrente. Cobriu-se com solução de LUGOL por 1 minuto. Escorreu-se e descorou-se com álcool acetona por aproximadamente 20 segundos. Lavou-se rapidamente com água. Escorreu-se o excesso de água e cobriu-se com Fucsina por 30 segundos. Escorreu-se, lavou-se com água corrente, secou-se ao ar e com papel filtro. Na coloração pelo método de Ziehl – Neelsen cobriu-se todas as lâminas com solução de fucsina, lavou-se com água corrente, escorreu-se e descorou-se totalmente com álcool, depois lavou-se imediatamente com água corrente e contracorou-se com solução de azul de metileno, lavou-se com água corrente, secou-se ao ar e com papel filtro. Em seguida colocou-se as lâminas no