coloração de gram

INTRODUÇÃO

De acordo com o Departamento de Microbiologia do Instituto de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Minas Gerais o método de Coloração de Gram,

é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838),[...] O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem,[...] A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos.

Esta experiência tem como objetivo principal a análise de bactérias encontradas na mucosa da boca dos alunos da disciplina de microbiologia, sob orientação da professora Renata Chequeller.

MÉTODO DE COLORAÇÃO DE GRAM

Material e Métodos

Material (reagentes e soluções); Foi utilizado secreção da mucosa dos alunos, violeta genciana, solução de iodo (lugol), álcool 96% e Fucsina básica (safranina).

Material (equipamentos); espátula, lâmina, isqueiro, pipeta e microscópio óptico.

Foi coletado secreção da mucosa da boca com o auxilio de uma espátula, transferiu-se a amostra para a lâmina. O próximo passo foi fixar o esfregaço na lâmina, com o auxílio de uma pipeta adicionou-se a solução de violeta genciana durante 1 minuto. Após esse tempo foi necessário escorrer e lavar em água corrente a lâmina rapidamente, então foi utilizada outra pipeta para cobrir a lâmina com lugol durante 1 minuto, também foi necessário escorrer e lavar a lâmina rapidamente