Coloração de gram

1778 palavras 8 páginas
COLORAÇÃO DE GRAM 1. Introdução

Coloração de Gram é um método de coloração de bactérias que foi desenvolvido, em 1884, pelo médico dinamarquês Christian Joachim Gram. Essa técnica consiste no tratamento de uma amostra bacteriana, fixada pelo calor, com os respectivos reagentes: cristal violeta (corante primário), lugol (fixador), etanol-acetona (solvente) e fucsina básica (corante secundário).
O método de Gram permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas de acordo com a composição da parede bacteriana. As bactérias Gram-positivas têm uma parede celular mais espessa de uma camada de peptídeoglicano (mureína). Nas Gram-negativas, além da camada de mureína ser menos espessa, existe ainda uma camada de lipopolissacarídeos (LPS).
A técnica de coloração de Gram baseia-se na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal de violeta durante o tratamento com etanol-acetona enquanto que as paredes das bactérias Gram-negativas não o fazem. O complexo cristal violeta-iodo tem caráter hidrofóbico, portanto, é insolúvel em água. Durante o tratamento com o solvente, a porção lipídica das membranas externas das bactérias Gram-negativas é dissolvida e o complexo iodopararrosanilina é removido, provocando a descoloração das células. Já as espessas paredes celulares das bactérias Gram-positivas são desidratadas pelo etanol-acetona, o que provoca a contração dos poros do peptideoglicano, tornando-as impermeáveis ao solvente. Com isso, o corante cristal violeta é retido e as células permanecem coradas. A lavagem com o solvente orgânico é uma etapa crucial no processo de coloração, pois caso haja exposição prolongada a esse solvente, mesmos nas bactérias Gram-positivas, o corante será removido, assim como ocorre com as bactérias Gram-negativas.
Como a retenção ou não do corante primário é dependente das propriedades físicas e químicas das paredes celulares das bactérias tais como espessura,

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