coloração de bacterias
Prof.ª Ms. Neiva A. Grazziotin
Colorações
• Preparação de Amostras para Microscopia
Óptica
• Preparação de Esfregaços para Coloração
– Colorações simples
– Colorações diferenciais
– Colorações especiais
Coloração - significa colorir um microrganismo com um corante, para tornar algumas estruturas mais visíveis.
Fixação - utiliza calor ou álcool para matar e fixar os organismos em uma lâmina.
Esfregaço - é um filme delgado de material usado para o exame microscópico.
Corantes – são sais compostos de um íon positivo e um íon negativo, um dos quais é colorido e é conhecido como cromóforo. Corantes básicos
• Violeta de genciana, azul de metileno, safranina • As bactérias são carregadas negativamente, e o íon positivo colorido de um corante básico irá corar as células bacterianas.
Corantes ácidos
• Eosina, tinta nanquim, nigrosina
• O íon negativo colorido de um corante ácido irá corar o fundo de um esfregaço bacteriano, produzindo uma coloração negativa.
COLORAÇÃO SIMPLES
• Coloração simples é uma solução aquosa ou alcoólica de um único corante básico.
• Ela é usada para tornar visíveis as formas e os arranjos celulares. • Um mordente pode ser usado para aumentar a afinidade de uma coloração e a amostra, e revestir uma estrutura para torná-la mais espessa e mais fácil de ver após ser corada.
• Corantes simples:
– Violeta de genciana, azul de metileno, safranina, carbolfuccina
COLORAÇÕES DIFERENCIAIS
• Os corantes diferenciais diferenciam as bactérias de acordo com suas reações aos corantes. • Mais usadas:
– coloração de Gram
– coloração de resistência ao álcool-ácido
Coloração de Gram
É uma das mais importantes técnicas de coloração em microbiologia médica. Entretanto, os resultados da coloração de Gram não são universalmente aplicáveis, pois algumas bactérias coram-se fracamente ou não coram.
• A coloração de Gram utiliza um corante púrpura (violeta de genciana),
iodo