Bioquimica

Dosagem de Proteína pelo Método de Biureto

Santa Bárbara d´Oeste
Maio 2011

Dosagem de Proteína pelo Método de Biureto

Trabalho de aproveitamento da disciplina de Bioquímica de Alimentos I do 5° semestre de Engenharia de Alimentos da Universidade Metodista de Piracicaba, sob a orientação da professora doutora Ana Célia Ruggiero.

Lucas Pereira da Silva RA: 09.4963-6
Nilo Cerezer Martins de Oliveira RA: 09.0601-6
Taís Tomazella RA: 09.4968-5
Suéllen Regina de Oliveira RA: 09. 1810-2
Tamires Ribeiro Hilário RA: 09.2704-6

Santa Bárbara d´Oeste
Maio 2011

INTRODUÇÃO TEÓRICA

As origens do método do Biureto podem ser traçadas desde a proposta inicial de Autenrieth, em 1915; posteriormente diversos autores propuseram modificações do mesmo, sendo, atualmente, a proposta metodológica de Gornall e cols9. a mais utilizada. O método se baseia na reação do reativo do Biureto, que é constituído de uma mistura de cobre e hidróxido de sódio com um complexante que estabiliza o cobre em solução, sendo o tartarato de sódio o recomendado por Gornall e cols.9. O cobre, em meio alcalino, reage com proteínas formando um complexo quadrado planar com a ligação peptídica. O produto de reação apresenta duas bandas de absorção, uma em 270 nm e outra em 540 nm. Apesar da banda na região de 270 nm aumentar em seis vezes a sensibilidade do método do Biureto, a banda na região de 540 nm é a mais utilizada para fins analíticos, porque diversas substâncias, normalmente presentes na maioria dos meios analisados, absorvem na região de 270 nm causando muita interferência no método. O método de Biureto tem sido aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sanguíneo, líquido cérebro espinhal, urina, alimentos, saliva, fibrinogênio e tecido animal. O método