Bioquimica clinica

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INSTRUÇÕES DE USO

CREATININA
(Jaffé) - Método colorimétrico para a determinação da Creatinina.
FINALIDADE O conjunto é um sistema que se destina à determinação da creatinina no soro ou plasma sangüíneos, urina e líquido amniótico. PRINCÍPIO DE AÇÃO A creatinina e outros cromogênios do soro reagem com o ácido pícrico em meio alcalino formando complexos corados com um máximo de absorção em 510nm. Após a obtenção da absorbância, adiciona-se ao soro um acidificante que desfaz o complexo creatinina-picrato, deixando intactos os complexos cromogênios-picrato, cuja absorbância é então medida. A diferença entre as duas leituras fornece o valor da creatinina verdadeira. Numa variação especialmente útil em sistemas de automação, mede-se a velocidade de formação do picrato alcalino,constituindo-se portanto em método cinético, sem a necessidade de acidificação e de obtenção de duas leituras espectrofotométricas. As leituras são obtidas nos minutos iniciais da reação, quando ainda não houve formação dos complexos cromogênios-picrato. REAGENTES CÓDIGO 07B Conjunto para 100 determinações de creatinina, contendo: 1. Tampão: 02 frascos com 100 mL cada, de solução aquosa contendo hidróxidode sódio 125 mmol/L e tetraborato de sódio 24 mmol/L. Conservar entre 15 e 25ºC. 2. Ácido Pícrico: 01 frasco com 50 mL de solução aquosa de ácido pícrico 44 mmol/L. Conservar entre 15 e 25ºC. 3. Acidificante: 01 frasco com 10 mL solução de ácido acético 11 mol/L. Conservar entre 15 e 25ºC. 4. Padrão: 01 frasco com 10 mL solução aquosa de creatinina 3,0 mg/dL. Conservar entre 15 e 25ºC. MATERIAISNECESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS Espectrofotômetro Centrífuga Banho-maria Cronômetro Vidraria Pipetas manuais ou automáticas Água destilada ou deionizada CUIDADOS NO ARMAZENAMENTO E TRANSPORTE DOS REAGENTES As datas de fabricação e validade aparecem no rótulo da embalagem. Não usar reagentes cuja data de validade tenha expirado. Todos os reagentes devem ser mantidos à temperatura ambiente, na faixa de 15a 25ºC. O reagente nº1 (Tampão) pode se cristalizar em temperaturas inferiores a 15ºC. Neste caso, aquecer a 37ºC até a dissolução dos cristais. PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS Reagentes Somente para uso diagnóstico “in vitro”. Evitar contaminação com íons metálicos ou agentes oxidantes. O reagente 1 é cáustico. Evitar contato com a pele. Não dispensar nas redes de água e esgotos. Caso hajacontato com quaisquer dos reagentes, lavar imediatamente a área afetada com água em profusão. Em casos de ingestão acidental, procure cuidados médicos imediatos. O espectrofotômetro ou mesmo equipamentos automatizados devem ficar livres de contaminação microbiana, serem calibrados corretamente e receberem manutenção de acordo com as instruções do fabricante. Não misturar ou trocar diferentes lotes dereagentes. Evitar contaminação microbiana dos reagentes e não utilizar reagentes que tenham sinais de contaminação. Usar pipetas de vidro e ponteiras descartáveis separadas para cada amostra, controle (se utilizado) e reagente e não trocar as tampas dos frascos dos reagentes, a fim de evitar contaminação cruzada, o que poderia causar resultados errôneos. Não dispensar os reagentes em tubulaçãocontendo ferro galvanizado. O Padrão (4) é fornecido em concentração usual fixa. O desempenho do ensaio pode ser afetado se este reagente for modificado ou não for armazenado nas condições recomendadas. CÁLCULOS 1. Creatinina = [(A1 - A2) ÷ Absorbância do Padrão] x 3 Fator de calibração = 3 ÷ absorbância do Padrão 2. 3. Creatinina (mg/dL) = (A1 - A2) x Fator 4. Urina (mg/24h) = ( mg/dL x volume de 24hem mL) ÷ 100 5. Creatinina (µmoles/L) = mg/dL x 88,40 Exemplo: Soro: Absorbância do padrão = 0,220 A1 = 0,330; A2 = 0,240 Creatinina (mg/dl) = [(0,330 - 0,240) ÷ 0,220] x 3 = 1,2 Fator de calibração = 3 ÷ 0,220 = 13,6 Creatinina (mg/dL) = (0,330 – 0,240 ) x 13,6 = 1,2 Urina: Absorbância do padrão = 0,220 A1 = 0,330; A2 = 0,040 Volume urinário = 900 mL/24h Fator de calibração = 3 ÷ 0,220 = 13,6...
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