Biologia

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Análise de água (Método dos tubos Múltiplos)
NMP/100 ml ( Número Mais Provável)

Enumeração de Coliformes Totais, fecais e Escherichia coli.
Prof. Ms Cleber Rogeres de Andrade


Para águapotável, a legislação brasileira prevê a ausência de microrganismos coliformes em 100 ml de amostra. Os coliformes são utilizados como microrganismos indicadores de higiene, sendo definidos como bacilosgram negativos, aeróbios ou anaeróbios facultativos, não esporulados e que produzem gás a partir de lactose, após 48 h a 35 ° C.

Família: Enterobacteriaceae
Gêneros : Escherichia, Enterobacter,Citrobacter e Klebsiela

Coleta de água para análise

As amostras de água serão coletadas em frascos estéreis. No caso de água tratada, será adicionado ao frasco, antes da esterilização, 0,1 mL detiossulfato de sódio 10%. Esta quantidade é suficiente para neutralizar o cloro residual de 100 mL de água.

1) Teste presuntivo para coliformes

Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST)

O LSTpossui alguma seletividade para organismos coliformes devido à presença do lauril sulfato, mas ainda permite a recuperação de bactérias que possam estar injuriadas ( expostas a condições adversas como apresença de cloro).

Para análise de água utiliza-se 10 tubos com 10 mL de LST dupla concentração, contendo um tubo invertido ( tubo de Durham) que aprisionará o gás que poderá ser produzido apartir da fermentação da lactose presente no meio de cultura. Os tubos inoculados são incubados a 35 ° C por 48 h e são observados para a produção de gás.













2) Testeconfirmativo para coliformes totais

Caldo Lactose Bile Verde Brilhante (VB)

Contém sais biliares e o corante verde brilhante, sendo mais seletivo que o LST e, permitindo a confirmação da presença decoliformes totais. Novamente neste caldo é observada a produção de gás a partir da lactose.

A partir dos tubos positivos (turvos com gás) do caldo LST passa-se, com auxílio de uma alça de níquel-cromo...
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