biologia

Ação enzimática: efeito do pH

1. Introdução
As enzimas são proteínas especializadas em catalisar reações biológicas, ou seja, aumentam a velocidade de uma reação química sem interferir no processo. Todas as enzimas são proteínas, mas nem todas as proteínas são enzimas. As proteínas, como um todo, ocupam um papel de destaque na dinâmica e estruturação dos organismos vivos. 1
A velocidade de uma reação está associada com vários fatores, enfatizando-se aqui o efeito do pH. A concentração de íons de hidrogênio afeta as enzimas de vários modos. Primeiramente, a atividade catalítica das enzimas esta relacionada á ionização de aminoácidos no do sitio ativo. Segundo, alterações nos grupos ionizáveis podem modificar a estrutura terciária das enzimas. Mudanças drásticas no pH promovem a desnaturação de muitas enzimas, apesar de algumas enzimas tolerarem grandes mudanças no pH, a maioria delas são ativas somente em intervalos muitos estreitos, por isso, os organismos vivo empregam tampões que regulam o pH. 2 O objetivo do experimento realizado foi verificar a influencia do pH na atividade enzimática.

2. Materiais e métodos
Enzima invertase (0,1 mg proteína/mL). Observação: manter no gelo depois de descongelada.
Tampão citrato-fosfato 0,05 M pH 2,0
Tampão acetato 0,05 M; pH 4,0
Tampão acetato 0,05 M; pH 5,0
Tampão fosfato 0,05 M pH 6,0
Tampão fosfato 0,05 M pH 7,0
Tampão fosfato 0,05 M pH 8,0
Tampão bicarbonato 0,05 M pH 9,0
Sacarose 0,2 M
Reativo: ADNS (ácido 3,5-dinitrossalicílico)
Pipetas graduadas de 1 e 10mL
Tubos de ensaio
Banho Maria
Espectrofotômetro

Procedimentos
Seguir o protocolo abaixo
Reativos
Tubos

1
2
3
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8
Tampão citrato-fosfato 0,05M pH 2,0
1,0
1,0
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Tampão acetato 0,05M; pH 4,0
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1,0
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Tampão acetato 0,05M; pH 5,0
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1,0
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Tampão fosfato 0,05M pH 6,0
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1,0
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Tampão fosfato 0,05M pH 7,0
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