Biologia molecular de plantas

Isolamento de DNA e RNA de alta qualidade a partir de folhas da planta carnívora Drosera rotundifolia

Resumo: Drosera rotundifolia pertencem a família das Drosera, um grande grupo de plantas carnívoras que carregam stalked glands ou glândulas em talos na superfície superior da folha para atrair, capturar e digerir insetos para a alimentação. Portanto, essas plantas podem viver em ecossistemas relativamente pobres. Elas são frequentemente usadas como ervas medicinais e têm várias outras características interessantes que lhes estão associadas. Na tentativa de avaliar o pool genético dessas plantas, nós experimentamos que muitos protocolos publicados para isolamento de ácido nucleico não produziram DNA e RNA de qualidade suficiente para análise. Portanto, nós desenvolvemos protocolos de extração à base de CTAB (hexadecyltrimethylammoniumbromide) para o isolamento de rotina de DNA e RNA de alta qualidade a partir de pequenas quantidades de folhas de Drosera rotundifolia cultivadas in vitro. Os métodos desenvolvidos são simples, rápidos e eficazes. O DNA obtido pode ser analisado por PCR, endonucleases de restrição e de hibridação (se refere a hibridação de filtros de nitrocelulose, ou seja Southern o Northern) em gel de DNA e o RNA obtido era de qualidade suficiente para RT-PCR e hibridação em gel de RNA.

Introdução
Plantas carnívoras adquiriram a capacidade única de capturar insetos em suas folhas e de absorver os nutrientes dos animais capturados. Portanto, tais plantas são capazes de crescer em ecossistemas úmidos baixos em nitrogênio, fósforo e possivelmente enxofre (Juniper et al., 1989; Samaj et al., 1999). O gênero mais comum de plantas carnívoras é o Droseraceae (Droseras) com cerca de 125 espécies de todos os continentes. Por várias razões espécies de Drosera estão se tornando raras na natureza (Juniper et al., 1989), e em métodos de cultura in vitro pode ser um dos métodos para manter o pool genético potencialmente valioso de tais plantas (Bobak et