biofisica

AULA PRÁTICA - DIÁLISE

Objetivos
Compreender os fenômenos biofísicos associados a processos biológicos e a atuação destes fenômenos nas técnicas de análises qualitativa e quantitativa.
Demonstrar que a difusão através de membrana depende de fatores físico-químicos (ex: temperatura, concentração dos meios);
Demonstrar que a diálise é um processo de difusão utilizado para purificação de moléculas.
Compreender as técnicas biofísicas de análises e sua importância para diagnóstico e dosagem de substâncias.

PROCEDIMENTO
Prepare uma estante com 8 tubos de ensaio, marque-os com: B, 0, 5, 10, 15, 20, 25 e 30, que corresponderão, respectivamente, ao tubo branco (B) e aos tempos (minutos) de coleta do material dialisado;
EXPERIMENTO 2: Diálise do azul de metileno à 0,1% contra água destilada, sob aquecimento. Foi colocado, em um Becker, 500 ml de água destilada e a barra magnética, em seguida se colocou o Becker sobre o agitador magnético;
Abriu o saco de Diálise e se pôs no mesmos 5 ml da solução de azul de metileno, finalizando com a amarração do saco com um cordão
Amarrou o saco de diálise no bastão de vidro e mergulhou ele no becker, de modo a não impedir a rotação da barra magnética;
Ao mergulhar o saco de diálise no becker, retirou-se imediatamente uma amostra de 5 ml da água nele contida que foi colocada no tubo de ensaio marcado com 0, esta foi a amostra correspondente ao tempo zero;
Nesse experimento além de ligar a rotação do agitador foi ligado também o aquecimento:
Depois da primeira amostra do tempo 0 realizamos a cada intervalo de 5 minutos a retirada de 5 ml da solução para ser colocada no tubo de ensaio até o tempo de 30 minutos;
Logo depois de coletar todas as amostras foi realizado de todas no fotocolorímetro, em 660 nm, usando água destilada branca (tubo B), para fazer a calibração.
Com os valores obtidos foi construindo um gráfico, tendo nas abscissa os valores de tempo (t), e nas ordenadas os valores de absorbância.