AULA PRÁTICA: CARACTERIZAÇÃO DE PROTEÍNAS (REAÇÃO DE BIURETO)

Introduçao e Fundamentos: A detecção de proteínas em materiais biológicos envolve reações específicas com determinados reativos, os quais originam substâncias coloridas que absorvem luz na região visível, permitindo a sua quantificação. Dentre os métodos utilizados, situa-se o método do biureto, que é baseado na reação do sulfato de cobre em meio alcalino (reativo do biureto), com proteínas e peptídeos. O nome do método provém do fato de que a uréia aquecida dará reação positiva, com desprendimento de amônia.
Objetivos e matéria prima: A reação do biureto é devida às ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para as substâncias que contém 2 grupos carbamínicos (-CO-NH2) ligados diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio.Este é o caso do biureto que dá reação positiva e de onde provém o nome da mesma. As proteínas ou peptídeos, quando tratados por uma solução de sulfato de cobre, em meio alcalino, dão uma coloração violeta característica.
EQUIPAMENTOS, UTENSÍLIOS:

3 tubos de ensaio
4 pipetas de vidro graduadas de 2ml, 5ml e 10ml
1 estante para tubos de ensaio
Placa aquecedora

REAGENTES:
Água destilada
Reativo biureto
Solução aquosa de amido 1% (p/v)
Solução aquosa de ovoalbumina

PROCEDIMENTO

SOLUÇÃO DE OVOALBUMINA:
Dissolver 3 ml de clara de ovo com 17 ml de água destilada, em um Erlenmeyer e adicionar 5,0 ml de HCl concentrado. Misturar.

Reativo de Bioreto:
Dissolva 1,5g de sulfato de cobre (CuSO4. 5H2O) e 6,0g de tartarato duplo de sódio e potássio (KNaC4H4O6. 4H2O) em 500 mL de água destilada. Adicione, sob agitação constante, 300 mL de solução de NaOH 10%. Adicione 1g de iodeto de potássio (KI). Complete o volume para 1L com água destilada e guarde o