AULA 1 CASSIA HISTOLOGIA

HISTOLOGIA
(AULA 1)

Prof. Cassia Pereira

Técnicas Histológicas
Sumário
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.

Colheita do material
Fixação
Desidratação
Diafanização (clareamento)
Impregnação
Inclusão
Microtomia
Interpretação do Corte
Extensão
Coloração

11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.

HE
PAS
Romanowsky
Papanicolau
Azul-de-metileno
Azul-de-toluidina
Montagem da Lâmina

Colheita do material
É a obtenção da peça, para biópsia ou necropsia Fixação
A fixação visa endurecer os tecidos, tornando-os mais resistentes e favoráveis às etapas subseqüentes da técnica histológica.
Pode ser feita por processos físicos ou químicos. A fixação química, mais usada em histologia, é feita por fixadores que podem ser simples ou compostos. (Forlmaldeído a 4% 10%), líquido de Bouin (uma mistura de formol, ácido pícrico e ácido acético). (Duração 12 horas)

Desidratação
Visa retirar a água dos tecidos, a fim de permitir a impregnação da peça com parafina. Para isto, a peça é submetida a banhos sucessivos em etanol de teor crescente (ex.: 70%, 80%, 90% e
100% x 2). (duração de 6 a 24h)

Diafanização ou Clareamento
Visa impregnar a peça com um solvente de parafina (Xilol* ou Benzol).
Nesta etapa os tecidos tornam-se translúcidos.
(facilitando a passagem da Luz)
Duração de1 a 6 h

*Xilol é um hidrocarboneto (Dimetilbenzeno) incolor, insolúvel em água e miscível em etanol, éter e outros solventes orgânicos, de odor característico, nocivo e inflamável

Impregnação
Permiti a obtenção de cortes suficientemente finos Os tecidos são submetidos a banhos de parafina a 60°C, no interior da estufa. (Xilol
Evapora) (duração de 30’ a 6h)

Inclusão
Seqüencialmente o material segue para inclusão em moldes metálicos e confecção de blocos de parafina, estando pronto para a fase de corte.

Microtomia etapa em que se obtém delgadas fatias de peças incluídas na parafina, através de um aparelho chamado micrótomo, que possui navalha de aço. A espessura dos cortes geralmente varia de 5 a 10 um (micrômetros).
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